【摘 要】
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目的探讨DEC2(Differentiated embryonic chondrocyte express gene2,又称BHLHE41或Sharp1)在乳腺癌细胞系MCF-7中对凋亡的调控作用,及其在他莫昔芬(Tamoxifen)药物抵抗中的
【机 构】
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中国医科大学病理学教研室,病理学与病理生理学研究所,
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目的探讨DEC2(Differentiated embryonic chondrocyte express gene2,又称BHLHE41或Sharp1)在乳腺癌细胞系MCF-7中对凋亡的调控作用,及其在他莫昔芬(Tamoxifen)药物抵抗中的意义。方法应用siRNA下调内源性DEC2后,通过TUNEL assay和Hoechst33258染色,观察肿瘤细胞的凋亡有无明显改变,并通过Real-time PCR和Western blot检测凋亡相关因子(Fas,caspase-8,ADP核糖聚合酶(PARP)和(Bax)在mRNA和蛋白水平的改变。应用Tamoxifen处理MCF-7,寻找诱导凋亡的合适处理浓度,并观察DEC2的表达变化。联合应用Tamoxifen与DEC2siRNA处理MCF-7,通过Western blot检测凋亡相关因子的表达变化。结果通过siRNA下调内源性DEC2后,凋亡相关因子(Fas和Bax)以及caspase-8和PARP的裂解产物均显著上调,并促进肿瘤细胞的凋亡。Tamoxifen可以上调DEC2的表达,联合应用Tamoxifen与DEC2siRNA处理与单一使用DEC2siRNA处理MCF-7相比,PARP和caspase-8的裂解产物明显上调,同时明显促进凋亡。相反,联合应用Tamoxifen与DEC2过表达质粒处理MCF-7后,PARP和caspase-8的裂解产物明显下调,同时明显抑制凋亡。结论 DEC2具有抑制乳腺癌细胞凋亡的作用,并能抑制由Tamoxifen诱导的乳腺癌细胞MCF-7的凋亡。
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