HPV18E7重组质粒的构建及在大肠杆菌中的表达优化

来源 :重庆医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：anchor1989

【摘要】

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目的：构建HPV18E7基因重组质粒，并探索其在大肠杆菌中的最佳表达条件。方法以提取的 HeLa细胞株中的DNA为模板PCR扩增 HPV18E7基因；将HPV18E7基因与载体pET-32a（＋）连接为重组质粒pE

【作者】

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胡仁建蔡家利刘利涂漫语徐涛杜翠容罗佳丁森

【机构】

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重庆理工大学药学与生物工程学院,南京大学生命科学学院

【出处】

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重庆医学

【发表日期】

：

2013年30期

【关键词】

：

HPV18 HPV18E7基因 HeLa细胞株自诱导培养基

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目的：构建HPV18E7基因重组质粒，并探索其在大肠杆菌中的最佳表达条件。方法以提取的 HeLa细胞株中的DNA为模板PCR扩增 HPV18E7基因；将HPV18E7基因与载体pET-32a（＋）连接为重组质粒pET-32a（＋）-HPV18E7；将该重组质粒转入大肠杆菌BL21-DE3-pLysS细胞中，探索优化表达的条件，以获得大量HPV18E7致癌蛋白。结果 PCR扩增的目标基因大小序列与HeLa细胞中的HPV18E7基因的大小序列一致。用LB培养基，IPTG和乳糖诱导表达显示不同浓度、不同温度、不

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