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柱色谱分离荧光黄和碱性湖蓝BB是基础有机化学实验教学中的重要内容，常用带玻璃塞的色谱柱以及柱子底部使用脱脂棉进行分离。文章通过对经典色谱柱的改进，选用了新的样品溶剂和洗脱剂，改玻璃塞为四氟阀门塞，以PPC代替脱脂棉，借助分光光度法绘制它们的标准曲线，定量测定洗脱以后的浓度，从而计算它们各自的收率，收率分别为98．1％和97．8％，对教材实验操作由定性分析转向定量分析，有很好的分离效果。