Gateway技术构建转基因重组质粒pRP.EX3d-EF1A-LRP16-His-IRES-eGFP

来源 :解放军医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：songxuesen70

【摘要】

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目的：构建转基因重组质粒pRP.EX3d-EF1A-LRP16-His-IRES-eGFP，为转基因鼠的建立奠定基础。方法利用重叠PCR技术扩增attB1-LRP16-His-attB2，经BP反应，将LRP16基因插入到载体pDown

【作者】

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柏苗苗王春萌伍志强梅倩李小雷李祥赵亚力韩为东

【机构】

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解放军总医院基础医学所分子生物室

【出处】

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解放军医学院学报

【发表日期】

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2014年3期

【关键词】

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LRP16 转基因小鼠质粒 GATEWAY技术 LRP16 transgenic mice plasmid gateway method

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目的：构建转基因重组质粒pRP.EX3d-EF1A-LRP16-His-IRES-eGFP，为转基因鼠的建立奠定基础。方法利用重叠PCR技术扩增attB1-LRP16-His-attB2，经BP反应，将LRP16基因插入到载体pDown上，pUp-EF1A、pDown-LRP16-His、pTail-IRES-eGFP和PRP.Des3d经LR反应，将LRP16转移到pRP.EX3d上，转化Stbl3细胞，用氨苄西林进行抗性筛选，经PCR鉴定后将阳性克隆送测序。结果测序及酶切结果验证获得正确的pRP.EX

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