【摘 要】
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在伪狂犬病病毒转移载体pBdTK＿Uni的多克隆位点中插入由SV40启动子控制下的LacZ基因表达盒,同时在右侧同源臂下游插入一个1 7kb的KpnI片段,构建成一个新的转移载体pUni＿LacZ。
【基金项目】
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国家863计划资助项目(2001AA213051)
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在伪狂犬病病毒转移载体pBdTK＿Uni的多克隆位点中插入由SV40启动子控制下的LacZ基因表达盒,同时在右侧同源臂下游插入一个1 7kb的KpnI片段,构建成一个新的转移载体pUni＿LacZ。用该载体与Bartha＿K61株基因组通过脂质体法共转染Vero细胞,经过10代蓝斑筛选纯化和PCR鉴定获得了一株稳定表达LacZ基因的伪狂犬病病毒gE/TK基因缺失突变株,命名为rPrV＿LacZ。在不同的细胞(PK＿15、IBRS＿2、Vero和CEF)上,对该重组病毒与亲本病毒的增殖滴度和细胞病变进行比较,未见显著差异。结果表明转移载体pBdTK＿Uni具有实用性,可用于构建伪狂犬病病毒基因工程活载体疫苗。
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