论文部分内容阅读
目的：表达纯化人类PIF1解螺旋酶C-末端的338—641氨基酸的多肽PIF^338-641，同时用纯化蛋白制备特异抗体。方法：从HeLa细胞的eDNA文库中PCR扩增得到PIF1解螺旋酶C-末端1012—1926的cDNA片段（对应氨基酸338—641），插入N-末端融合有六聚组氨酸的表达载体pET15b产生pET15b—PIF^338-641重组质粒，转化Rosetta^TM2（DE3）感受态细胞，使PIF^338-641蛋白在大肠杆菌中表达，用自制的镍亲和柱纯化PIF^338-641蛋白，并以纯化蛋