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目的
探讨转化生长因子β1(TGF–β1)对肺泡上皮细胞上皮–间质转化的影响及与钙蛋白酶的关系。
方法体外培养人Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549细胞株，将传代培养的细胞分为空白对照组、TGF–β1处理组、TGF–β1＋钙蛋白酶抑制剂处理组、钙蛋白酶抑制剂组，给予相应处理后Western–blot和RT–PCR分别检测上皮细胞标志物E钙黏素和间质细胞标志物α–平滑肌肌动蛋白(α–SMA)及钙蛋白酶–1(Calpain–1)的表达。
结果与空白对照组对比，TGF–β1组钙蛋白酶–1的mRNA表达及蛋白表达明显增高(P<0.01)，E钙黏素的mRNA表达及蛋白表达均明显降低(P<0.01)，α–SMA的mRNA表达及蛋白表达明显增高(P<0.01)；加入钙蛋白酶抑制剂后再加入TGF–β1刺激，相对于TGF–β1处理组，钙蛋白酶–1的mRNA表达及蛋白表达明显降低(P<0.01)，E钙黏素的mRNA表达及蛋白表达明显升高(P<0.05)，α–SMA的mRNA表达水平及蛋白表达水平明显降低(P<0.01)，而与对照组比较，钙蛋白酶–1、E钙黏素、α–SMA表达无明显差异(P>0.05)；单加入钙蛋白酶抑制剂后，与空白对照组比较，钙蛋白酶–1、E钙黏素、α–SMA的mRNA表达及蛋白表达无明显差异(P>0.05)。
结论TGF–β1可以通上调钙蛋白酶的表达诱导A549细胞发生上皮–间质转化。