通过制备携带NIS及EGFP基因的重组慢病毒并转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)，探讨NIS基因监测BMSCs向颅内脑胶质瘤迁移的可行性。
方法将NIS及EGFP基因片段分别亚克隆至慢病毒载体pLVX－puro，制备慢病毒pLVX－CMV－NIS－EGFP，同时构建对照组慢病毒pLVX－CMV－0－EGFP。分离培养BMSCs，转染后经嘌呤霉素筛选，得到稳定干细胞株BMSCs－NIS－EGFP及对照组干细胞株BMSCs－EGFP。Western blot分析NIS蛋白在细胞中的表达。通过摄碘实验、NaClO4抑制实验验证NIS蛋白的功能。制备裸鼠颅内脑胶质瘤模型，经尾静脉注入BMSCs－NIS－EGFP，24 h后行125I microSPECT显像，观察NIS作为报告基因监测BMSCs－NIS－EGFP向颅内脑胶质瘤迁移的情况。
结果成功构建并制备重组慢病毒pLVX－CMV－NIS－EGFP及pLVX－CMV－0－EGFP，完成BMSCs的分离培养。病毒转染经嘌呤霉素筛选得到稳定干细胞株BMSCs－NIS－EGFP及BMSCs－EGFP。Western blot显示NIS基因在BMSCs－NIS－EGFP中大量表达，而在BMSCs－EGFP中无表达。细胞摄碘实验显示BMSCs－NIS－EGFP细胞具有摄碘功能，30 min摄碘峰值是对照组BMSCs－EGFP细胞的近10倍，且其摄碘可被NaClO4显著抑制。成功制备裸鼠脑胶质瘤模型，microSPECT显像显示颅内脑胶质瘤部位有明显的125I放射性摄取增高。
结论重组慢病毒pLVX－CMV－NIS－EGFP可使NIS基因在BMSCs中表达并介导125I的摄取，NIS基因可有效监测BMSCs向颅内脑胶质瘤的迁移，这为开展以BMSCs为载体、由NIS介导的脑胶质瘤基因靶向治疗奠定了基础。