【摘 要】
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利用H2O2/过氧化物酶(POD)/愈创木酚(GA)反应体系的产物(470 nm)吸光度去定量POD活性是目前常用方法之一,但产物不稳定且对比色皿有吸附现象是该反应的主要缺点之一。为了解
【机 构】
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四川大学化学工程学院,四川大学基础医学与法医学院
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利用H2O2/过氧化物酶(POD)/愈创木酚(GA)反应体系的产物(470 nm)吸光度去定量POD活性是目前常用方法之一,但产物不稳定且对比色皿有吸附现象是该反应的主要缺点之一。为了解决此问题,本研究利用GA的荧光特性建立了一种能准确测定POD活性的方法。用辣根过氧化物酶(HRP)作为测试样品得到了以下优化条件:0.5 mmol/L GA,0.5 mmol/L H2O2,0.05 mol/L PBS缓冲液(p H 6.0),反应温度20℃,样品耗量20μL;本方法的线性范围为500~60000 U/L(r=0.9993),RSD≤2.4%(n=11),检出限为385 U/L。在优化条件下,用白萝卜提取液作为测试样品,用本方法((9714±132)U/L)与比色法((9926±352)U/L)和循环催化流动分析法((9608±456)U/L)进行了对比,结果表明,3种方法相互一致性很好。
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