在泡囊水溶液中磷脂酶A2水解卵磷脂反应的研究

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本文建立了一套能够适应于在泡囊水溶液中进行的磷脂酶A2催化水解蛋黄卵磷脂的紫外在线检测方法。该方法具有实验误差小、使用样品少、操作简单等优点。 在卵磷脂/十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)/庚烷/水形成的泡囊水溶液中,通过在线检测产物与酚红的作用物在559nm处的吸光度变化,研究了磷脂酶A2(PLA2,EC 3.1.1.4)催化水解蛋黄卵磷脂的行为。研究结果表明:(1)磷脂酶A2催化活性受温度、底物浓度、酶浓度、表面活性剂浓度、钙离子浓度等因素的影响,在[E]=1.79umol·L-1,[S]=20mmol·L-1,[CTAB]=400mmol·L-1,[Ca2+]=400mmol·L-1,t=40℃时,磷脂酶A2活性最大。(2)在底物浓度为7.5—25mmol·L-1范围内,酶催化行为符合Michaelis-Menten动力学方程,并得表观米氏常数Km和表观最大反应速率常数Vm
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