【摘 要】
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目的观察微滴法及麦管法玻璃化冻存家兔卵巢组织对各级卵泡的形态学及卵母细胞增殖活性的影响,探讨适宜的卵巢组织玻璃化冻存方案及玻璃化冷冻容皿。方法将6只健康雌性日本大
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目的观察微滴法及麦管法玻璃化冻存家兔卵巢组织对各级卵泡的形态学及卵母细胞增殖活性的影响,探讨适宜的卵巢组织玻璃化冻存方案及玻璃化冷冻容皿。方法将6只健康雌性日本大耳白家兔随机分为2组,分别采用无载体的微滴法及麦管法以DMSO+EG方案玻璃化冻存家兔卵巢组织,复苏后行HE组织切片染色及PCNA免疫组化染色,显微镜下观察各级卵泡组织形态学的改变及始基卵泡和初级卵泡卵母细胞PCNA表达的变化。结果1.微滴法及麦管法玻璃化冻存家兔卵巢组织复苏后始基卵泡、初级卵泡及次级卵泡的形态正常率分别下降为75.00%和78.80%、47.07%和41.18%及14.29%和29.49%,与新鲜对照组比较(86.92%、78.57%及86.67%),差异均有显著性(P<0.05);而两组间比较,差异无显著性P>0.05)。2.微滴法及麦管法玻璃化冻存家兔卵巢组织,始基卵泡及初级卵泡母细胞PCNA阳性表达率分别为73.77%及70.87%,与新鲜对照组比较(78.04%),差异无显著性(P>0.05);两组间比较,差异也无显著性(P>0.05)。结论1.微滴法及麦管法玻璃化冷冻方案均对家兔卵巢组织造成一定程度的损伤,各级卵泡的形态正常率明显下降。但始基卵泡仍能保持较高的形态正常率(75.00%和78.80%)。2.上述两种冷冻方法对家兔卵巢组织始基及初级卵泡卵母细胞的增殖活性未造成明显影响,PCNA的阳性表达率无明显变化。3.微滴法玻璃化冻存家兔卵巢组织对各级卵泡形态学的影响及对始基、初级卵泡卵母细胞PCNA的表达与麦管法比较无明显差异。4.麦管法因避免了组织与液氮的直接接触,故可避免微生物的污染,临床应用更安全可靠,所以目前玻璃化冷冻卵巢组织应以麦管法为宜。
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