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本试验旨在建立一种可同时鉴别牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌的多重PCR方法。分别针对多杀性巴氏杆菌A型特异的hyac-hvaD基因区段、化脓隐秘杆菌的16SrRNA基因上保守区段和牛支原体的UvrC基因设计特异性引物，多重PCR的最佳扩增条件确定为：95℃ 10min预变性；95℃ 1min，56℃ 50s，72℃ 1min，循环30次；72℃ 210min延伸。结果表明，该多重PCR方法可同时扩增出以上三种致病菌的特异性片段，不能扩增出其他病原菌的相关片段；对多杀性巴氏杆菌A型、化脓隐秘杆菌和牛支