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目的 建立I—Sce I系统并应用该系统制备DNA双链断裂（DSB）的HepG2细胞模型，为进一步研究DSB与HBVDNA整合奠定基础。方法通过分子克隆技术构建携带I—Sce I内切酶识别序列的pEGFP。真核表达载体，并将其转染入肝癌细胞株HepG2，经G418筛选出稳定转染株，随后瞬时转染表达归位内切酶I—Sce I的质粒pCMV-3NSL-I-Sce I。24h后采用免疫荧光法和Western blot检测DNA双链损伤效应分子Y—H2AX的表达，了解DSB情况。结果酶切鉴定和测序证实pEGFP。构建成功；I-Sce I系统引入后HepG2细胞中的γ-H2AX表达明显上调，提示DSB细胞模型构建成功。结论I-Sce I系统能够成功地诱导HepG2细胞株基因组发生DSB，该系统有望为进一步探讨DSB是否为HBV整合的潜在靶位提供有效的研究工具。