【摘 要】
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为了在大肠杆菌中构建利用葡萄糖生产L-乳酸的途径,以鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)LA-04-01基因组为模板,设计引物扩增L-乳酸脱氢酶基因L-ldh。将该基因连接到表达载
【机 构】
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北京化工大学生命科学与技术学院北京市生物加工过程重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(20876011), 北京市自然科学基金资助项目(2071002), 国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(2007CB707804), 国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2006AA020103 2006AA020102 2006AA020201 2007AA100404 2007CB714304)
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为了在大肠杆菌中构建利用葡萄糖生产L-乳酸的途径,以鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)LA-04-01基因组为模板,设计引物扩增L-乳酸脱氢酶基因L-ldh。将该基因连接到表达载体pET-28a(+)上,并转化大肠杆菌Top10。通过卡那霉素抗性平板筛选,提取重组质粒pET28a-L-ldh并测序,结果正确。将pET28a-L-ldh转化大肠杆菌BL-21(DE3),通过卡那霉素抗性平板筛选,得到产乳酸的大肠杆菌基因工程菌。经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳,检测到目的蛋白
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