鸡传染性喉气管炎病毒可视化LAMP快速诊断方法的建立和应用

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:frkzhu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
试验旨在建立简易、快速、高效的鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus,ILTV)检测和诊断方法。根据GenBank上公布的ILTV TK基因序列,设计检测ILTV的特异性环介导的等温扩增(loop mediated isothermal amplification,LAMP)技术反应引物,通过对LAMP反应体系和反应条件的优化,以及特异性、敏感性和临床样品的检测,建立了ILTV LAMP检测方法。结果显示,以内引物ILT9-FIP和ILT9-BIP、外引物ILT9-F3和ILT9-B3、环引物ILT9-LB和ILT9-LF为LAMP反应引物,反应温度为66℃时,所建立的LAMP检测方法反应效率最高;所建立的LAMP检测方法能够特异性地检测ILTV(匈牙利株和王岗株),不与新城疫病毒(NDV,B株)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV,H52株和H120株)、大肠杆菌、鸡副嗜血杆菌、巴氏杆菌等发生交叉反应,且能够检测到的病毒最低浓度达到0.06pg/μL,其灵敏度是普通PCR方法的100倍;采用建立LAMP方法对50个临床样本进行检测,阳性率为14%,且与PCR检测结果的符合率达96%。本研究建立了特异性强、灵敏度高、操作简单的LAMP检测方法,适用于临床上ILTV的快速检测和诊断。
其他文献
近年来,海洋油气开发呈现从浅海向深海发展的趋势,但随着开采水深加大,海上环境作用愈加严酷,传统刚性管道的设计与施工日益复杂,铺设费用呈几何级数增加。针对这一状况,本文
在卫星通信系统中,由于微波频段频率资源的枯竭以及毫米波频段射频技术的发展,使得发展高频段卫星通信系统成为必要和可能。EHF频段(也称毫米波)是可供优选的频段之一,本文所
伴随着我国计划经济向市场经济的转型,城乡规划不再是一种“自上而下模式”单纯的技术手段,城乡规划的公共政策属性决定了它的社会性、开放性和互动性。城乡规划需要对各种利
高血压肾病即原发性高血压引起的良性小动脉肾硬化和恶性小动脉肾硬化,并伴有相应临床表现的疾病。高血压持续5年到10年就极有可能出现肾脏小动脉硬化症,根据病理改变、临床表
目的:本论文对从李东垣“阴火”理论论治糖尿病,为从补脾益气、升阳泻火法治疗糖尿病提供重要依据。方法:在认真学习李东垣的《脾胃论》和搜集整理历代医家有关“阴火”理论论述
目的通过对多类食品中环己基氨基磺酸钠(甜蜜素)测定的样品前处理技术和测定方法的研究,建立简便、快速、适用的食品中甜蜜素的高效液相色谱测定方法。方法选用30%乙醇提取样
本文主要研究了高地温隧道隔热材料的基本性能及隔热体系的温度场变化问题。近年来,随着国内西部铁路建设的飞速发展,隧道建设向长大超深发展,各种地质问题和环境条件越来越
<正>目的毛细支气管炎是婴幼儿时期较常见的急性下呼吸道感染性疾病,在儿童期易患支气管哮喘 (简称哮喘),本研究拟通过对毛细支气管炎患儿3~10年的临床随访,观察其日后支气管
会议
各位代表、同志们:$$玉林市第五届人民代表大会第六次会议,经过全体代表和与会同志的共同努力,顺利完成了各项任务,即将胜利闭幕。$$会议期间,全体代表以高度的政治责任感和主人翁
报纸
SPV是一个专门为实现资产证券化而设立的特设的机构,具有专设性的特征.笔者首先分析了它的法律性质,认为它是一个经营范围只限于资产证券化的非营利性的社会团体法人;其次,阐