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根据显微图像的几何特点，提出了基于HT（Hough Transform）十字显微图像亚像素定位算法（SLACHT）和基于HT近似圆显微图像亚像素定位算法（SLARHT），对显微图像特征中的直线和近似圆的亚像素定位做了深入的研究。通过与经典直线HT定位算法和经典随机HT圆定位算法进行实验对比，验证了该定位算法的优越性；通过与Matlab中的直线HT定位算法和圆HT定位算法进行实验对比，验证了该算法的可靠性。大量实验表明，该算法的定位精度优于0．01像素，具有运行速度快、鲁棒性强的特点。