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目的：了解采取干预措施对降低多重耐药菌（MDRO）感染的效果。方法2013年10月—2014年9月对我国12个省市46所医院进行调查，其中2013年10月—2014年3月为基线调查阶段（干预前），该阶段未采取任何干预措施；2014年4—9月为实施干预措施阶段（干预后），比较干预前后 MDRO 感染情况及防控措施依从性。结果共监测34081例病例，住院总日数为302818 d，MDRO 医院发病的感染（HOI）1122例次，HOI 例次发病率为3．71‰。各种 MDRO 以 CRAB HOI 例次日发病率（2．47‰）最高，各重症监护病房（ICU）以外科 ICU HOI 例次日发病率（5．55‰）最高。总体 MDRO HOI 例次日发病率由干预前的3．96‰，降至干预后的3．53‰，差异有统计学意义（P ＝0．03）；干预后呼吸 ICU 和急诊 ICU HOI 例次日发病率均低于干预前（均 P ＜0．05）。干预后各项防控措施：实施隔离、同种病原体隔离、悬挂隔离标识、手卫生、戴手套、物品专用依从率，以及医生、护士、保洁员知晓率均明显提高，差异均有统计学意义（均 P ＜0．05）。结论通过采取 MDRO 防控措施及对其依从性进行监测，可有效提升各措施的依从性，降低 MDRO HOI 发病率。