牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌和牛结核分枝杆菌三重PCR快速检测方法的建立

来源 :贵州农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kisscase

【摘要】

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为建立快速、准确的检测牛呼吸道主要病原菌牛支原体(Mycoplasma bovis)、牛多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)及牛结核分枝杆菌(M.tuberculosis)的方法,对牛支原体oppD

【作者】

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杨莉余波张涛姜玲玲刘镜杨丽娟孙启跃徐景峨龙玲

【机构】

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贵州省农业科学院畜牧兽医研究所,贵州省清镇市动物疫病疫防控制中心,贵州省黔西县农业农村局

【出处】

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贵州农业科学

【发表日期】

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2020年5期

【关键词】

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牛支原体牛多杀性巴氏杆菌牛结核分枝杆菌三重PCR Mycoplasma bovisPasteurella multocidaMycobacterium t

【基金项目】

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贵州省农业攻关计划项目“肉牛支原体病防控关键技术研究”[黔科合支撑(2016)2503],贵州省农业农村厅项目“贵州省现代肉牛产业技术体系建设”(GZCYTX-0301),贵州省科技厅项目“贵州省肉牛养殖工程技术研究中心建设项目”[黔科合平台人才(2016)5201],贵州省科技厅项目“牛羊产业高值化配套技术集成应用与科技帮扶行动计划”[黔科合服企(2019)4010],贵州省科学科技重点项目“贵

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为建立快速、准确的检测牛呼吸道主要病原菌牛支原体(Mycoplasma bovis)、牛多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)及牛结核分枝杆菌(M.tuberculosis)的方法,对牛支原体oppD基因序列、牛多杀性巴氏杆菌Pm-kmt基因序列、牛结核分枝杆菌IS6110基因序列分别设计特异性引物,对单一PCR检测方法进行优化后建立三重PCR检测方法。结果表明:三重PCR的最佳扩增条件为94℃预变性10min;94℃1min,60℃50s,72℃1min,循环30次;72℃延伸10

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