果蝇血液发育标记基因mrj的多克隆抗体制备及检测

来源 :湖南师范大学自然科学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:landingyao
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珂是黑腹果蝇中一个蛋白编码基因.根据已报道的m巧基因序列,利用生物信息学分析选取果蝇唧基因抗原亲水区,通过PCR扩增出其部分编码区序列,将其连接到pET-28a原核表达载体上.经酶切及测序鉴定质粒构建成功后,将重组质粒(pET-28a-mrj)转入Rosetta菌后通过IPTG(Isopropylβ—D—thiogalactoside)诱导表达出带His标签的重组融合蛋白后用镍柱纯化.将纯化的蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用WesternBlot检测抗体的效价和特异性.
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