牡荆素调控M1/M2型巨噬细胞极化抗肺腺癌转移的作用研究

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zwfyazl
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目的:探讨牡荆素对M1/M2型巨噬细胞的调控作用和机制.方法:利用脂多糖(LPS)和IL-4诱导M1/M2型鼠源巨噬细胞RAW264.7,通过CCK8法检测不同浓度牡荆素对RAW264.7细胞的活力影响来确定牡荆素的最适浓度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time RT-PCR)法检测牡荆素对巨噬细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-1β、精氨酸酶1(Arg-1)、甘露糖受体(MR)基因表达的影响;通过Griess反应法检测牡荆素对巨噬细胞上清液中NO含量的影响;Transwell小室迁移实验检测由IL-4诱导的M2型巨噬细胞对非小细胞肺癌A549的体外迁移及牡荆素干预的影响;流式实验检测牡荆素对M2型巨噬细胞表型CD206的影响.Western blot检测磷酸化信号传导及转录激活因子3表达.结果:牡荆素在25、50、100 mol/L浓度时对小鼠巨噬细胞无明显细胞毒性,确定25、50、100 μmol/L浓度进行后续实验.RT-PCR实验表明牡荆素呈剂量依赖性抑制M1表型标记物iNOS和IL-1β基因的mRNA表达,抑制M2型巨噬细胞表型中Arg-1和MR基因的mRNA表达.Griess反应法表明牡荆素呈浓度依赖抑制巨噬细胞M1表型中NO含量,同时抑制由M2型巨噬细胞诱发肺腺癌A549细胞的迁移能力的加剧.流式细胞术结果显示牡荆素能够抑制M2表型CD206的表达且呈浓度依赖性.Western blot结果显示牡荆素能够降低p-STAT3蛋白水平.结论:牡荆素通过调控STAT信号通路,调节巨噬细胞M1/M2的表型极化和标志性产物的表达,抑制巨噬细胞向M2极化,从而降低肺腺癌细胞A549细胞体外迁移力.
其他文献
对接触苯系混合物的女工737人及对照女工1251人的妊娠经过及妊娠结局进行了调查,应用回顾性队列研究方法。结果表明,孕期接触苯系混合物女工的妊娠剧吐、妊高征、妊娠期贫血、自然流产及低出生体重发生率明显高于对照组。Logistic回归分析表明,妊高征、妊娠期贫血、自然流产、低出生体重的发生主要与接触苯系混合物有关联,与妊娠年龄、妊娠时被动吸烟等因素无关。接触组女工所在车间空气中苯、甲苯、二甲苯的年平