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【摘 要】目的：探讨尿微量白蛋白（mALB）、尿转铁蛋白（TRF）、尿免疫球蛋白G（IgG）、尿α1-微球蛋白（α1-MG）、尿β2微球蛋白（β2-MG）等尿微量蛋白的聯合检测对糖尿病早期肾病的预警价值。方法：选取我院2016年5月至2017年5月100名被确诊为2型糖尿病同时尿蛋白为阴性的患者，采用免疫散射比浊法检测其尿微量白蛋白（mALB）、尿转铁蛋白（TRF）、尿免疫球蛋白G（IgG）、尿α1-微球蛋白（α1-MG）、尿β2微球蛋白（β2-MG）五项指标，同时选取健康体检者40名作为对照组。结果： DM组的IgG（8.32±5.58）、α1-MG （18.64 ±12.84）、mALB（29.14± 22.62）、 TRF （2.70±1.68）及β2-MG（0.36 ±0.14）明显高于正常对组；五种蛋白单项检测IgG 、α1-MG 、mALB、 TRF及β2-MG的阳性率分别为20%、54%、39%、39%、34%，五项联合检测的阳性率高达90%。结论：尿微量蛋白系列测定可以达到早期诊断的目的，联合检测可以明显提高DN的检出率。
【关键词】尿微量蛋白；2型糖尿病；糖尿病肾病
【中图分类号】R587.2 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2019）01-0028-02
糖尿病（diabetes mellitus，DM）是由多种病因引起的以慢性高血糖为特征的代谢性疾病，糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病重要的慢性微血管并发症之一，是糖尿病病人主要死亡原因之一，DN在2型糖尿病病人中发病率为20%—30%。[1]DN起病隐匿，早期常缺乏明显的临床症状，而一旦出现了临床症状，则已进入大量蛋白尿期，病情发展难以控制，最终导致终末期肾功能衰竭，DN在早期存在可逆性，如能干预治疗，去除不利因素，则肾脏病变有可能恢复，因此DN的早期发现及诊断就显得尤为重要，而最早和最为重要的临床征象是微量蛋白尿。本文探讨五种尿微量蛋白联合检测对DN的早期诊断价值。
1 对象及方法
1.1 研究对象
DM患者选择我院2016年5月至2017年5月住院和门诊确诊的2型糖尿病患者100名，年龄在40—60岁之间，平均年龄（45.6±3.24），尿常规检测尿蛋白阴性，并排除高血压、肾脏疾病、尿路感染及心脑血管等疾病史。对照组选择我院体检中心确定的合格者40名，年龄在40-60岁之间，平均年龄（45.1±3.38），各项检查指标均正常，无心、肝、肾、肺等重要的脏器疾病，肝肾功能正常，无糖尿病史。所有志愿者、患者及家属对该实验知情同意，并自愿签署知情同意书。实验组和对照组在一般资料（身高、年龄、体重等）方面差异无统计学意义（P>0.05）。
1.2方法
所有受试者空腹12 h，于第2日留取晨尿10 mL，3000转/分离心10min，取上清液2ml，使用西门子公司特种蛋白分析仪BN Ⅱ测定尿微量白蛋白（mALB）、尿转铁蛋白（TRF）、尿免疫球蛋白G（IgG）、尿α1-微球蛋白（α1-MG）、尿β2微球蛋白（β2-MG），方法是免疫速率散射比浊法，采用西门子公司提供的试剂。
2 统计分析
采用SPSS19.0统计软件对上述数据进行分析。数值以均数±标准差（）和率表示，采用两样本均数t检验，P<0.05为差异有显著性。
3 结果
3.1 2型糖尿病组尿IgG 、α1-MG 、mALB、 TRF及β2-MG明显高于健康对照组，均P<0.05，具有统计学意义。见表1。
3.2 五项微量蛋白单项检测及联合检测的阳性率 单项检测IgG 、α1-MG 、mALB、 TRF及β2-MG的阳性率分别为20%、54%、39%、39%、34%，五项联合检测的阳性率高达90%。见表2。
4 讨论
研究显示，DN以早期肾小球高滤过，肾小球肥大，导致肾小球系膜区细胞外基质（ECM）增生，肾小管间质纤维化，最终导致肾小球硬化为主要病理特征[2]。尿微量蛋白检测是早期诊断DN的敏感实验室指标。
（1）尿微量白蛋白 正常情况下，肾小球滤过膜存在电荷选择性屏障，在静电同性排斥作用下，绝大部分的mAlb不能通过滤过膜，尿mAlb分子量为69 kD，带负电荷。DN早期，由于肾小球基底膜负电荷乙酰硫酸肝素、唾液酸等成分减少，使肾小球滤过膜的电荷选择性降低，并干扰了蛋白多糖与细胞外基底膜间的亲和力，改变了基底膜中其他成分的相互关联，致使肾小球滤过膜上滤孔孔径增大以及肾小球滤过膜富含带负电荷的结构改变，从而导致mAlb在尿中排出增多，尿mAlb是反映肾小球功能的主要指标。
（2）尿转铁蛋白 TRF在生理状况下，由于肾小球滤过膜对蛋白质滤过存在电荷屏障的作用，很难通过肾小球滤过膜，一旦肾小球疾病，电荷屏障受损，TRF其所带负电荷较mAlb少，因而更易通过带负电荷的肾小球滤过膜，故TRF能更敏感地反映电荷屏障受损情况，而TRF的增加与肾小管间质的损害也有关。临床研究中也证实 ，在肾小球损伤的早期 UTRF 较 MALB 相比更为敏感[3]。
（3）尿免疫球蛋白G IgG属于大分子量蛋白，正常情况下不能通过肾小球滤膜，当其在尿中出现，意味着肾小球滤膜严重损伤，当与白蛋白同时升高，往往提示肾病变已向慢性期过渡，增加的lgG与DN不同的临床病变程度及肾脏的不同病理改变密切相关。
（4）尿α1微球蛋白 α1-MG在正常人尿中只能检出少量，而当肾小管受损时，尿中α1-MG首先增加，并且尿α1-MG不受尿液酸碱度影响，与其他低分子蛋白相比是反映近曲肾小管受损的早期敏感指标[4] 。
（5）尿β2微球蛋白 β2-MG可自由通过肾小球，然后在近曲小管内几乎全部被重吸收。进入早期DN，影响到肾小管重吸收功能时，尿β2-MG明显升高。
本研究显示，DN组的尿IgG 、α1-MG 、mALB、 TRF及β2-MG明显高于正常对照组，说明在糖尿病肾病的早期，尿蛋白阴性的情况下，肾脏的肾小球和肾小管已经开始受损。而五种微量蛋白单项检测IgG 、α1-MG 、mALB、 TRF及β2-MG的阳性率分别为20%、54%、39%、39%、34%，五项联合检测的阳性率高达90%，说明联合检测提高检出的阳性率。
综上所述，DN尿微量蛋白系列测定可以达到早期诊断的目的，联合检测可以明显提高DN的检出率及初步判断受损部位，从而为治疗赢得宝贵时间，使DN在临床肾脏病期出现前就得到有效治疗，控制病情进展，减少DN终末肾脏病期的发生。
参考文献
[1]BAKRIS G L ，WILLIAMS M ，DWORKIN L ，et al .Pre- serving renal function in adults with hypertension and dia- betes ：a consensus approach [J].Am J Kidney Dis，2000，36（3）：646-661.
[2]Okada S，Shikata K，Matsuda M，et al.Intercellular adhesionmolecule-1-deficient mice are resistant against renal injury after induction of diabetes[J].Diabetes，2003，52（10）：2586-2593.
[3]位松华.α1-微球蛋白检测对于糖尿病肾病早期诊断的临床价值分析[J].中国实验诊断学，2015，19（6）：1001-1003.
[4]吴晓玉，陈云霞，何新华.急性肾损伤的新型生物标记物[J]中华急诊医学杂志，2014，23（5）：587-591.
黑龙江省卫生厅科研课题（2011-533）
【关键词】尿微量蛋白；2型糖尿病；糖尿病肾病
【中图分类号】R587.2 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2019）01-0028-02
糖尿病（diabetes mellitus，DM）是由多种病因引起的以慢性高血糖为特征的代谢性疾病，糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病重要的慢性微血管并发症之一，是糖尿病病人主要死亡原因之一，DN在2型糖尿病病人中发病率为20%—30%。[1]DN起病隐匿，早期常缺乏明显的临床症状，而一旦出现了临床症状，则已进入大量蛋白尿期，病情发展难以控制，最终导致终末期肾功能衰竭，DN在早期存在可逆性，如能干预治疗，去除不利因素，则肾脏病变有可能恢复，因此DN的早期发现及诊断就显得尤为重要，而最早和最为重要的临床征象是微量蛋白尿。本文探讨五种尿微量蛋白联合检测对DN的早期诊断价值。
1 对象及方法
1.1 研究对象
DM患者选择我院2016年5月至2017年5月住院和门诊确诊的2型糖尿病患者100名，年龄在40—60岁之间，平均年龄（45.6±3.24），尿常规检测尿蛋白阴性，并排除高血压、肾脏疾病、尿路感染及心脑血管等疾病史。对照组选择我院体检中心确定的合格者40名，年龄在40-60岁之间，平均年龄（45.1±3.38），各项检查指标均正常，无心、肝、肾、肺等重要的脏器疾病，肝肾功能正常，无糖尿病史。所有志愿者、患者及家属对该实验知情同意，并自愿签署知情同意书。实验组和对照组在一般资料（身高、年龄、体重等）方面差异无统计学意义（P>0.05）。
1.2方法
所有受试者空腹12 h，于第2日留取晨尿10 mL，3000转/分离心10min，取上清液2ml，使用西门子公司特种蛋白分析仪BN Ⅱ测定尿微量白蛋白（mALB）、尿转铁蛋白（TRF）、尿免疫球蛋白G（IgG）、尿α1-微球蛋白（α1-MG）、尿β2微球蛋白（β2-MG），方法是免疫速率散射比浊法，采用西门子公司提供的试剂。
2 统计分析
采用SPSS19.0统计软件对上述数据进行分析。数值以均数±标准差（）和率表示，采用两样本均数t检验，P<0.05为差异有显著性。
3 结果
3.1 2型糖尿病组尿IgG 、α1-MG 、mALB、 TRF及β2-MG明显高于健康对照组，均P<0.05，具有统计学意义。见表1。
3.2 五项微量蛋白单项检测及联合检测的阳性率 单项检测IgG 、α1-MG 、mALB、 TRF及β2-MG的阳性率分别为20%、54%、39%、39%、34%，五项联合检测的阳性率高达90%。见表2。
4 讨论
研究显示，DN以早期肾小球高滤过，肾小球肥大，导致肾小球系膜区细胞外基质（ECM）增生，肾小管间质纤维化，最终导致肾小球硬化为主要病理特征[2]。尿微量蛋白检测是早期诊断DN的敏感实验室指标。
（1）尿微量白蛋白 正常情况下，肾小球滤过膜存在电荷选择性屏障，在静电同性排斥作用下，绝大部分的mAlb不能通过滤过膜，尿mAlb分子量为69 kD，带负电荷。DN早期，由于肾小球基底膜负电荷乙酰硫酸肝素、唾液酸等成分减少，使肾小球滤过膜的电荷选择性降低，并干扰了蛋白多糖与细胞外基底膜间的亲和力，改变了基底膜中其他成分的相互关联，致使肾小球滤过膜上滤孔孔径增大以及肾小球滤过膜富含带负电荷的结构改变，从而导致mAlb在尿中排出增多，尿mAlb是反映肾小球功能的主要指标。
（2）尿转铁蛋白 TRF在生理状况下，由于肾小球滤过膜对蛋白质滤过存在电荷屏障的作用，很难通过肾小球滤过膜，一旦肾小球疾病，电荷屏障受损，TRF其所带负电荷较mAlb少，因而更易通过带负电荷的肾小球滤过膜，故TRF能更敏感地反映电荷屏障受损情况，而TRF的增加与肾小管间质的损害也有关。临床研究中也证实 ，在肾小球损伤的早期 UTRF 较 MALB 相比更为敏感[3]。
（3）尿免疫球蛋白G IgG属于大分子量蛋白，正常情况下不能通过肾小球滤膜，当其在尿中出现，意味着肾小球滤膜严重损伤，当与白蛋白同时升高，往往提示肾病变已向慢性期过渡，增加的lgG与DN不同的临床病变程度及肾脏的不同病理改变密切相关。
（4）尿α1微球蛋白 α1-MG在正常人尿中只能检出少量，而当肾小管受损时，尿中α1-MG首先增加，并且尿α1-MG不受尿液酸碱度影响，与其他低分子蛋白相比是反映近曲肾小管受损的早期敏感指标[4] 。
（5）尿β2微球蛋白 β2-MG可自由通过肾小球，然后在近曲小管内几乎全部被重吸收。进入早期DN，影响到肾小管重吸收功能时，尿β2-MG明显升高。
本研究显示，DN组的尿IgG 、α1-MG 、mALB、 TRF及β2-MG明显高于正常对照组，说明在糖尿病肾病的早期，尿蛋白阴性的情况下，肾脏的肾小球和肾小管已经开始受损。而五种微量蛋白单项检测IgG 、α1-MG 、mALB、 TRF及β2-MG的阳性率分别为20%、54%、39%、39%、34%，五项联合检测的阳性率高达90%，说明联合检测提高检出的阳性率。
综上所述，DN尿微量蛋白系列测定可以达到早期诊断的目的，联合检测可以明显提高DN的检出率及初步判断受损部位，从而为治疗赢得宝贵时间，使DN在临床肾脏病期出现前就得到有效治疗，控制病情进展，减少DN终末肾脏病期的发生。
参考文献
[1]BAKRIS G L ，WILLIAMS M ，DWORKIN L ，et al .Pre- serving renal function in adults with hypertension and dia- betes ：a consensus approach [J].Am J Kidney Dis，2000，36（3）：646-661.
[2]Okada S，Shikata K，Matsuda M，et al.Intercellular adhesionmolecule-1-deficient mice are resistant against renal injury after induction of diabetes[J].Diabetes，2003，52（10）：2586-2593.
[3]位松华.α1-微球蛋白检测对于糖尿病肾病早期诊断的临床价值分析[J].中国实验诊断学，2015，19（6）：1001-1003.
[4]吴晓玉，陈云霞，何新华.急性肾损伤的新型生物标记物[J]中华急诊医学杂志，2014，23（5）：587-591.
黑龙江省卫生厅科研课题（2011-533）