体外验证SSA报告载体系统对CRISPR/Cas9的切割效率

来源 :微生物学免疫学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zzjkan

【摘要】

：

目的根据单链退火(single strand annealing, SSA)修复途径原理,构建萤火虫荧光素酶荧光报告基因系统,体外检测SSA报告载体对CRISPR/Cas9的切割效率及gRNA的特异性和剪切活性。方法基于SSA修复DNA双链断裂损伤需要断裂末端包含一段同源重复序列的原理,构建4个萤火虫萤光素酶luciferase基因报告质粒,其中luciferase基因被分成前后两个片段;PCR先扩增luciferase基因319~1 653 bp片段并连接至巨细胞病毒(cytomegalovirus,

【作者】

：

骈亚亚陶凤蓉高振祥胡继红

【机构】

：

北京医院国家老年医学中心

【出处】

：

微生物学免疫学进展

【发表日期】

：

2021年4期

【关键词】

：

荧光素酶 CRISPR/Cas9 剪切活性同源臂

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