长双歧杆菌抗毒素基因mazE细菌双杂交诱饵质粒的构建与鉴定﹡

来源 :徐州医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:winterdxm7124
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:构建细菌双杂交系统中的诱饵载体pBT-mazE,为长双歧杆菌的压力调控机制研究奠定基础。方法 PCR扩增抗毒素蛋白MazE的编码基因,插入到带有λcI基因的载体pBT构建诱饵质粒pBT-mazE。将pBT-mazE转化至大肠杆菌报告菌株XL-1 Blue MRF′Kan,检测诱饵蛋白mazE-λcI的表达。将pBT-mazE和pTRG空载体共转化报告菌株XL-1 Blue MRF′Kan,通过3-氨基-1,2,4-三氮唑(3-amino-1,2,4-triazole,3-AT)选择性筛选平板检测诱饵质粒的自激活作用。结果酶切和测序结果显示MazE蛋白编码序列成功克隆入载体pBT,融合区读码框正确。诱饵质粒pBT-mazE能够表达诱饵蛋白mazE-λcI。 pBT-mazE和pTRG空载体共转化的报告菌株XL-1 Blue MRF′Kan在含有3-AT的选择性筛选平板上无菌落生成,而在no 3-AT非选择性筛选平板上生长良好,表明诱饵质粒pBT-mazE在细菌双杂交系统中无自激活作用。结论所构建的诱饵载体pBT-mazE可以用于细菌双杂交的进一步实验。
其他文献
在北大教授陈向明的《教师专业发展需要什么“理论”的指导》一文的启示下,南京市教科所的研究人员和全市教师开展了两轮关于教育理论的大讨论,大家一致认为:一线教师需要教
借助于美国破产保护法第十一章,违约公司获得一个额外的违约观察期过程,通过纳什均衡原理对股东和债权人的利益进行重新分配,利用巴黎型期权的定价思想来刻画具有这种违约观
Objective: To investigate the reliability for fast estimation of Michaelis-Menten constant (Km) with calibrated specific activity at only two medium concentrati
通过半补齐法建立棉铃虫多核衣壳型多角体病毒A1 HearMNPV-A1(Helicoverpa armigera multiple nucleocapsid nucleopolyhedrovirus-A1)的质粒基因组文库,拼接了一个24 553 bp
从房地产开发、家庭装修设计、工业产品设计等行业的发展趋势的分析出发,说明在建筑设计行业实现产业化的必要性和迫切性,并提出以流程管理、标准化操作、专业化人才培养和职
能量分析、能值分析和(火用)分析是探索能量利用效率的三种方法,其中(火用)分析是将热力学第一定律和第二定律结合起来分析能源的利用情况的方法,既考虑了能量的数量又考虑了
[目的]研究福建省近10年臭鼩数量的分布规律.[方法]利用近10年福建省鼠疫监测中所获得的鼠情监测资料,按不同气候区划对其进行统计分析.[结果]在气温高的区划中臭鼩密度亦高,
本研究试图探讨用"自上而下"和"自下而上"相结合的建模方法,对我国二氧化硫和二氧化碳减排进行区域间建模.本研究以一个用于分析硫税的区域间波及影响、以及评价电力部门的脱
我们的淋巴组织存在数千亿T细胞,其通过血流循环,探测并摧毁病变细胞,但癌细胞常遁形于免疫系统,并且塑造一个抑制T细胞活性、存活和迁移的微环境。 T细胞的基因工程可以克服这些
目的:研究脊髓NF-κB /IL-6信号通路在小鼠烫伤痛中的作用。方法造模分组:将24只小鼠随机分为正常组(N组)、假手术组(S组)和烫伤疼组(BI组),每组8只。检测造模当天和造模后3、7和14天各组