论文部分内容阅读
目的：构建Gankyr／n基因的真核表达载体并转染NIH3T3细胞，获得稳定转染Gankyrin的NIH3T3细胞株，研究Gankyrin在真核细胞中的表达及功能。方法：通过RT-PCR方法从肝癌细胞SMMC-7721，中扩增获得人Gankyr／n编码区基因，克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP上，利用阳离子脂质体转染NIH3T3细胞，经G418筛选获得稳定表达的细胞克隆。RT-PCR检测Gankyr／n转染细胞后的转录；荧光显微镜观察确定Gankyrin在细胞中的定位分布；MTT法测定Gankyri