【摘 要】
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目的观察环状RNA含有16A的脱水酶结构域分子(circRNA ABHD16A)-微小RNA(miRNA，miR)-1237-5p-细胞凋亡相关酪氨酸激酶(AATK)轴对乳腺癌细胞密歇根癌症基金会7号细胞(MCF-7)凋亡的影响。方法运用中国科学引文数据库(CSCD)和Target Scan在线分析分别分析ABHD16A与miR-1237-5p和miR-1237-5p与AATK的相关性。利用Luc
【机 构】
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目的观察环状RNA含有16A的脱水酶结构域分子(circRNA ABHD16A)-微小RNA(miRNA，miR)-1237-5p-细胞凋亡相关酪氨酸激酶(AATK)轴对乳腺癌细胞密歇根癌症基金会7号细胞(MCF-7)凋亡的影响。
方法运用中国科学引文数据库(CSCD)和Target Scan在线分析分别分析ABHD16A与miR-1237-5p和miR-1237-5p与AATK的相关性。利用Luciferase assay检测circRNA ABHD16A是否靶向miR-1237-5p以及miR-1237-5p是否靶向AATK。在过表达或敲低circRNA ABHD16A的情况下，通过蛋白质印迹法(Western blot)检测AATK和乳腺癌细胞MCF-7凋亡标志蛋白表达；通过噻唑蓝(MTT)实验分析乳腺癌细胞MCF-7的细胞活力；通过磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V)染色检测乳腺癌细胞MCF-7的凋亡水平。Student’s t检验分析两组单向方差分析。
结果circRNA ABHD16A靶向miR-1237-5p；miR-1237-5p靶向AATK 3’UTR的320-326和469-475区域。过表达ABHD16A时，AATK的表达量明显上升(t＝15.295，P<0.01)，细胞凋亡相关蛋白bcl-2拮抗剂(bak)，bcl-2相关X凋亡调节因子(bax)和被切割的胱天蛋白酶9(cleaved-Cas9)的表达量明显上升(t＝7.403、8.381、21.583，P<0.01)，而bcl-2细胞凋亡调节剂(bcl-2)的表达量明显下降(t＝6.301，P<0.01)，MCF7细胞活力水平下降(t＝17.392，P<0.01)，凋亡水平上升(t＝8.491，P<0.05)。敲低ABHD16A时，AATK的表达量明显下降(t＝9.290，P<0.01)，细胞凋亡相关蛋白bak、bax和cleaved-Cas9的表达量明显下降(t＝8.381、5.296、11.492，P<0.01)，而bcl-2的表达量明显上升(t＝5.609，P<0.01)，MCF7细胞活力水平上升(t＝5.694，P<0.01)，凋亡水平下降(t＝13.502，P<0.01)。
结论circRNA ABHD16A靶向miR-1237-5p后增加AATK的表达量，并促进乳腺癌细胞MCF-7凋亡。
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