【摘 要】
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目的 体外表达锥虫早老素蛋白亲水区肽段,以制备抗血清用于功能研究.方法 根据锥虫早老素蛋白二级结构特性,设计引物分别扩增N端及C端片段的亲水区肽段基因,装入原核表达载体
【机 构】
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深圳市疾病预防控制中心,深圳,518020日本名古屋市立大学医学院感染生体防御学,日本名古屋;
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目的 体外表达锥虫早老素蛋白亲水区肽段,以制备抗血清用于功能研究.方法 根据锥虫早老素蛋白二级结构特性,设计引物分别扩增N端及C端片段的亲水区肽段基因,装入原核表达载体进行表达,并通过变性纯化方法获得足够量表达蛋白,制备兔抗血清.结果 成功扩增并克隆锥虫早老素蛋白亲水区片段L2及L7,并分别采用变性磁珠法和变性树脂法进行大量蛋白产物纯化,浓缩纯化产物制备兔抗血清经Western blot杂交验证,出现目的 蛋白大小阳性条带.结论 成功表达锥虫早老素蛋推测N端及C端亲水肽段,并成功制备抗血清,可用于锥虫早老素蛋白功能分析.
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