【摘 要】
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目的 探讨miR-29b对卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响,及其与SP1的靶向关系.方法 选取卵巢癌细胞株SKOV3、正常人卵巢表面上皮细胞HOSEpiC作为研究对象,通过Lipofectamine 2000将质粒分别转染SKOV3细胞,分为NC组(未进行任何处理)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-29b组(转染miR-29b-mimics)、si-NC组(转染si-NC)、si-SP1组(转染si-SP1).采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞迁移
【机 构】
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海南医学院第一附属医院妇科,海口570102
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目的 探讨miR-29b对卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响,及其与SP1的靶向关系.方法 选取卵巢癌细胞株SKOV3、正常人卵巢表面上皮细胞HOSEpiC作为研究对象,通过Lipofectamine 2000将质粒分别转染SKOV3细胞,分为NC组(未进行任何处理)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-29b组(转染miR-29b-mimics)、si-NC组(转染si-NC)、si-SP1组(转染si-SP1).采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western blot检测细胞SP1表达水平,实时荧光定量PCR法检测细胞miR-29b、SP1基因mRNA表达水平,生物信息预测miR-29b与SP1的靶向作用关系,荧光素酶实验验证.结果 卵巢癌细胞株SKOV3细胞miR-29b表达低于HOSEpiC细胞(P<0.01).48h和72h时,与NC组比较,miR-29b组、si-SP1组细胞增殖能力明显降低(P<0.05).与NC组比较,miR-29b组、si-SP1组细胞迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05).双荧光素酶报告基因检测结果提示SP1为miR-29b的靶基因.结论 miR-29b在卵巢癌细胞中低表达,miR-29b过表达可抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,其机制与调控SP1有关.
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