猪李氏杆菌病药敏试验

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  猪李氏杆菌病发病率低,病死率高,常给养猪业造成经济损失。药物防治是控制本病的重要手段,但李氏杆菌是细胞内寄生菌,易产生耐药性,给临床治疗带来很大困难,所以,治疗本病时,应通过药敏试验选择敏感抗生素,才能达到满意的治疗效果。
  2013年2月,普兰店市某养猪场饲养80头30~40日龄仔猪突然发病,精神沉郁、食欲减少或废绝、腹泻、呼吸困难、运动失调、转圈、角弓反张,并出现死亡。剖检见皮肤有紫斑,黏膜、浆膜有轻微出血,腹水增多,胃底部有出血斑,小肠充血,心肌有针尖大小灰白色坏死灶,肺肿大,在心叶、尖叶、膈叶切面均有散在的灰红色、灰白色点状病灶,肝脏肿大,颜色变浅,表面有灰白色坏死灶。本次发病仔猪9头,死亡5头。经细菌分离鉴定,确定为产单核细胞李氏杆菌感染。
  一、药敏试验方法
  1.病原分离培养 无菌取心、肝、肺、脾、淋巴结和脑等组织,分别接种于普通琼脂、鲜血琼脂、麦康凯琼脂平板培养基上,37℃需氧培养24小时,观察病菌生长情况。在鲜血平板上菌落呈淡灰色、细小、透明、光滑、边缘整齐;在普通培养基上培养24小时后,可形成直径为0.15~1毫米、圆形、灰色、透明、边缘整齐的菌落,菌落较小,生长缓慢,呈乳白色、圆点状;在麦康凯琼脂培养基上,形成针尖大小、无色、透明菌落。钩取单个菌落再进行纯培养。
  2.生化试验 分离菌经24小时血清平板纯培养后,进行生化试验。该细菌能分解葡萄糖、麦芽糖、鼠李糖、果糖且产酸不产气;不能分解甘露醇、木糖和乳糖;靛基质及硫化氢试验阴性;不液化明胶;甲基红试验和V-P(二乙酰试验)反应阳性;不还原硝酸盐。
  3.药敏试验 采用纸片法,取纯化菌种,用生理盐水适当稀释后,吸取0.1毫升接种于琼脂平板表面,用涂抹棒涂布均匀,将药敏片贴于培养基表面,各片距离相等,37℃培养24小时,观察结果。
  二、结论
  本次试验该菌对氨苄青霉素、庆大霉素、链霉素、环丙沙星、卡那霉素高度敏感;对磺胺嘧啶钠、氟苯尼考、强力霉素、复方新诺明、氧氟沙星、克林霉素、诺氟沙星中度敏感;对新霉素、土霉素、红霉素、头孢唑啉不敏感。
  通过以上的药敏试验,用青霉素克钾对发病猪场内发病的9头猪,按每公斤体重1万~1.5万单位,肌肉注射,每日1次,连注3日。3日后发病猪体温下降,且有饮欲、食欲,1周后不再死亡猪只,且全部康复。对其他未发病的66头猪用链霉素,每头猪50万~100万单位,肌肉注射,每日2次,连注2日,进行预防治疗,1周后未发现有发病猪只。
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