验证衣原体能够从小鼠生殖道传播至胃肠道,并在胃肠道长期定植。
方法5 ~ 6周龄雌性C57BL/6J小鼠120只,分为阴道接种组(35只)、灌胃接种组(30只)、肛门直肠接种组(30只)、眶后静脉丛接种组(5只),感染鼠衣原体,同时每组均设阴性对照,5只/组。各组小鼠均在感染后第3、7天及此后每隔7天用拭子取阴道及直肠分泌物,检测拭子中脱落细胞感染衣原体的数量。应用间接免疫荧光、定量PCR检测接种后第7、14、28、56、105天阴道接种组小鼠生殖道(阴道、子宫、输卵管及卵巢)、胃肠道(胃、小肠、盲肠、结肠、直肠)、肠外组织(心、肝、脾、肺、肾)中的衣原体活菌量及基因组(活菌量与基因拷贝数以10为底数对数转换),观察生殖道输卵管积水及炎症程度、胃肠道的组织病理变化;检测接种后第28天、56天灌胃接种组、肛门直肠接种组小鼠衣原体在生殖道及胃肠道的感染及致病情况。眶后静脉丛接种组在接种后的第3、5、7、10、14天小鼠尾静脉取血,检测血中衣原体的活菌量及基因组,观察感染第56天时生殖道、胃肠道致病情况。
结果阴道接种后第7天,所有小鼠的生殖道、胃肠道及肠外组织均检测到活菌和基因组,阴道的菌量及其基因拷贝数常用对数值最高分别为6.26 ± 0.56、7.30 ± 0.23,直肠的菌量及其基因拷贝数常用对数值分别为2.60 ± 1.95、4.87 ± 0.09;第28天时,心脏、肺等肠外组织中均未检测到活菌,生殖道和胃肠道组织仍可检测到活衣原体,阴道菌量及其基因拷贝数常用对数值分别为3.47 ± 1.06、5.80 ± 1.49,直肠菌量及其基因拷贝数常用对数值分别为4.00 ± 0.35、5.14 ± 0.81;第56天时,仅在胃肠道组织中检测到活病原体;第105天,在胃肠道中仍检测到衣原体活菌和基因组,直肠的菌量及其基因拷贝数常用对数值可分别达到2.60 ± 0.65、4.29 ± 0.57。灌胃接种组、肛门直肠接种组小鼠,在接种第28、56天时,所有小鼠胃肠道均检测到衣原体活菌和基因组。眶后静脉丛接种组衣原体在血液中生存14 d左右,第14天所有小鼠均在肛门直肠拭子中检测到活菌。阴道接种鼠衣原体56 d后,5只小鼠的生殖道形成严重的输卵管积水及慢性炎症,输卵管扩张,但胃肠道未见到明显的炎症细胞浸润;其他接种途径亦未在胃肠道观察到炎症病理变化。
结论衣原体生殖道感染后可致系统播散,能够传播至胃肠道,在胃肠道定植并长期生存。