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突变株的构建是细菌基因功能研究的前提。构建了一个可用于布鲁氏菌突变株构建的自杀质粒。在pUC19质粒的多克隆位点插入卡那霉素抗性基因，在该基因两侧添加多个酶切位点。构建成为pUC19K。利用该质粒，构建了布鲁氏菌外膜蛋白Omp25基因的突变株。结果表明，利用该自杀质粒，通过一轮筛选即可得到目标基因被抗性基因替换的突变株。pUC19K质粒的构建及成功应用，为布鲁氏菌突变株的构建提供了一个快速有效的手段，也为布鲁氏菌的基因功能研究奠定了基础。