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目的 建立多重PCR结合反向线点杂交技术同时检测淋球菌、沙眼衣原体、生殖支原体、人型支原体、微小脲原体、解脲脲原体和毛滴虫的方法.方法 设计7对生物素标记的上述病原体特异性引物同时扩增病原体靶基因.扩增产物与预先标记在尼龙膜上的特异性探针杂交、显影,判读结果.多重PCR结合反向线点杂交方法检测211个尿道、宫颈分泌物临床标本(男107例,女104例),并与传统单一引物PCR检测结果比较,评价反向线点杂交的敏感性和特异性.结果 多重PCR结合反向线点杂交技术能敏感和特异地检测所有这7种病原体标准株,能敏感地枪测病原体100拷贝的靶基因.在211个临床标本的检测中,2.8%(6/211)的标本使用多重PCR结合反向线点杂交技术检测为阳性,而单一引物PCR检测为阴性,再使用巢式PCR检测这6个标本,结果为阳性.结论 多重PCR结合反向线点杂交技术能快速、敏感和特异地检测多种性病病原体。