【摘 要】
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目的构建A、B、C和D四种基因型HBV克隆载体,分析和比较它们在HepG2和Huh7细胞中的表达和复制。方法利用分子生物学技术将连接在pUC19上的A、B、C和D四种基因型HBV全序列连接
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目的构建A、B、C和D四种基因型HBV克隆载体,分析和比较它们在HepG2和Huh7细胞中的表达和复制。方法利用分子生物学技术将连接在pUC19上的A、B、C和D四种基因型HBV全序列连接到改建的pIRES2-EGFP真核表达载体中;脂质体转染法将构建的重组载体瞬时转染入HepG2和Huh7细胞中;利用载体所携带的绿色荧光蛋白在显微镜下观察转染效率,并利用ELISA和荧光定量PCR技术检测细胞培养上清中HBsAg、HBeAg和HBV DNA的表达水平。结果经鉴定,重组HBV真核表达载体构建成功,在HepG
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