研究水飞蓟宾联合克唑替尼对间变性淋巴瘤激酶(ALK)基因阳性非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的增殖抑制作用和机制。

采用单加水飞蓟宾、单加克唑替尼或两药联合作用于NSCLC细胞株H2228和H3122，以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和克隆形成实验检测细胞的增殖活性，以划痕实验和侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力，以免疫荧光实验检测细胞上皮间质转化(EMT)标志蛋白E－Cadherin和Vimentin的表达情况，以Western blot法检测细胞中ALK、p－ALK、E－Cadherin和Vimentin蛋白的表达变化。将H2228细胞悬液注射入裸鼠皮下，构建裸鼠移植瘤模型，观察移植瘤的生长情况。

MTT法检测结果显示，当水飞蓟宾浓度为100 μmol/L时，H2228和H3122细胞的存活率分别为(88.38±4.10)%和(72.27±3.62)%，对细胞的增殖活性影响较小。当100 μmol/L的水飞蓟宾与克唑替尼联合使用时，克唑替尼对H2228细胞的IC₅₀从(917.10±7.75)nmol/L下降到(238.73±7.67)nmol/L，对H3122细胞的IC₅₀从(472.50±15.70)nmol/L下降到(206.10±12.01)nmol/L，联合用药后克唑替尼对H2228和H3122细胞的IC₅₀明显降低。与对照组H2228细胞比较，100 μmol/L水飞蓟宾组、400 nmol/L克唑替尼组、100 μmol/L水飞蓟宾联合400 nmol/L克唑替尼组H2228细胞的克隆形成率分别为(83.34±2.72)%、(69.42±3.06)%和(27.32±1.42)%；与对照组H3122细胞比较，100 μmol/L水飞蓟宾组、400 nmol/L克唑替尼组、100 μmol/L水飞蓟宾联合400 nmol/L克唑替尼组H2228细胞的克隆形成率分别为(84.45±5.67)%、(45.02±5.83)%和(17.43±3.83)%。水飞蓟宾联合克唑替尼后，H2228和H3122细胞的克隆形成能力均明显下降(均P<0.01)。迁移和侵袭实验结果显示，水飞蓟宾与克唑替尼联用能明显抑制H2228细胞的迁移和侵袭(均P<0.01)。Western blot法检测结果显示，无论单用水飞蓟宾、还是联合克唑替尼，H2228细胞中E－Cadherin蛋白的表达明显升高，p－ALK、Vimentin蛋白表达明显下降，ALK总蛋白的表达无明显变化。单用克唑替尼组和联合用药组的肿瘤重量分别为(9.40±2.58)g和(4.58±1.07)g，联合用药组的抑瘤效果明显好于克唑替尼单药组(P<0.05)。

水飞蓟宾可增强克唑替尼对ALK阳性NSCLC细胞的增殖抑制作用，其机制可能与两药联用能进一步降低ALK阳性NSCLC细胞的ALK活性，促进间质上皮转化(MET)的发生有关。