滇龙胆甲羟戊酸激酶基因的克隆与表达分析

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【摘要】

：

甲羟戊酸激酶是甲羟戊酸途径的关键酶。根据滇龙胆转录组甲羟戊酸激酶基因Gr MK序列,设计一对基因特异性引物克隆该基因,并进行序列分析;构建原核表达载体p GEX-4T-1-Gr MK,

【作者】

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张晓东李彩霞赵静杨娇王元忠

【机构】

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玉溪师范学院资源环境学院,云南省农业科学院药用植物研究所

【出处】

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生命科学研究

【发表日期】

：

2015年3期

【关键词】

：

滇龙胆甲羟戊酸激酶基因克隆表达分析 Gentiana rigescens mevalonate kinase gene cloning expres

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（81260608）, 云南省教育厅重点项目（2013Z075）, 科技部“十二五”国家科技支撑计划项目（2011BAI13B02-04）, 云南省大学生创新项目（201411390001）

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甲羟戊酸激酶是甲羟戊酸途径的关键酶。根据滇龙胆转录组甲羟戊酸激酶基因Gr MK序列,设计一对基因特异性引物克隆该基因,并进行序列分析;构建原核表达载体p GEX-4T-1-Gr MK,转入大肠杆菌Rosetta（DE3）,重组蛋白在37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导下成功表达。生物信息学分析结果表明,Gr MK蛋白为甲羟戊酸激酶家族成员,具有MK蛋白保守结构域：乳糖激酶/高丝氨酸激酶/甲羟戊酸激酶/磷酸甲羟戊酸激酶（GHMP kinase）N端结构域、C端结构域和ATP结合结构域;Gr MK与长春

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