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为建立准确实时地定量检测病毒性出血性败血症病毒（VHSV），在VHSV-N基因保守区设计了TaqmanMGB探针与引物对，随后，采用体外转录技术获得了VHSV-N基因RNA，并以此为绝对定量标准品，建立了绝对定量（AQ）检测VHSV的实时荧光RT-PCR法（AQ—RT—PCR方法），并与世界动物卫生组织（OIE）推荐的普通RT—PCR法进行了比较。此荧光RT-PCR法特异性好，与其他鱼类弹状病毒无交叉反应。检测线性范围为10m～102拷贝／反应，灵法度达102拷贝／反应。此检测灵敏度比OIE推举的RT-P