小鼠GP73敲低质粒的构建

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目的:用pSUPER-NEO空载体构建可以敲低小鼠高尔基蛋白73(mGP73)表达的重组质粒pSUPER-mGP73-siRNA,并鉴定其功能。方法:合成靶向mGP73基因区的3条小干扰RNA(si RNA)mGP73-si RNA1、mGP73-si RNA2和mGP73-si RNA3,通过细胞实验挑选干扰效率大于60%的siRNA,用于合成能够敲低mGP73的重组质粒;重组载体经双酶切和测序鉴定正确后转染4T1细胞,检测转染质粒后细胞内mGP73的mRNA水平;将重组质粒p SUPER-mGP73-
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