论文部分内容阅读
旨在原核表达Smad4基因,纯化获得GsT-Smad4融合蛋白。以人表皮HaCaT细胞的cDNA为模板,利用PCR扩增含有BamHI和Sal I酶切位点的Smad4基因;然后将其克隆到pGEx4T-1原核表达载体中,将正确的重组载体转入大肠杆菌BL21(DE3);用I胛G诱导表达,再利用MagneGST particles亲和纯化GST-Smad4融合蛋白;最后通过Westemblot鉴定此融合蛋白。结果显示,成功构建pGEX-4T-1-smad4原核表达载体;30%条件下,0.2mmol/L的IPTG能