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目的从牛原始生殖细胞中分离克隆牛胚胎干细胞。方法采用与同源胎儿成纤维细胞共同培养的方法，以高糖DMEM添加0．1mM2-巯基乙醇、犊牛血清为培养基，以4-13周龄牛胎儿为实验材料，从牛原始生殖细胞中分离克隆牛胚胎干细胞。结果参与胚胎干细胞分离克隆的4．0例牛胎儿中，一体长6．5cm的雌性胎儿胚胎干细胞传到15代；分离得到的牛胚胎干细胞，经碱性磷酸酶染色，体外分化实验，核型分析证明其具有胚胎干细胞的诸多特性。结论可以从4-13周龄牛胎儿的原始生殖细胞中分离克隆胚胎干细胞。