【摘 要】
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旨在构建真核表达载体pcDNA-PDGF-GAL,观察重组质粒转染N-2a细胞后甘丙肽基因(galanin,GAL)的表达水平。采用PCR方法,以重组质粒pUC18-PDGF-GAL为模板,扩增PDGF-GAL基因序列,最终定
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旨在构建真核表达载体pcDNA-PDGF-GAL,观察重组质粒转染N-2a细胞后甘丙肽基因(galanin,GAL)的表达水平。采用PCR方法,以重组质粒pUC18-PDGF-GAL为模板,扩增PDGF-GAL基因序列,最终定向克隆入载体pcDNA3.1并替换该载体的CMV启动子与增强子序列,从而构建具有神经细胞特异性的表达载体pcDNA-PDGF-CAL。然后利用脂质体法将重组质粒瞬时转染小鼠N-2a细胞,分别在转染后24、48和72h收集细胞及细胞培养物,采用RT-PCR和ELISA方法,鉴定GAL基
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