【摘 要】
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目的 观察苗药验方对家兔骨关节炎模型软骨细胞的影响，并探讨其防治骨关节炎软骨退变的作用机制。方法 36只家兔随机分为正常对照组、模型组、苗药熏蒸组、苗药离子导入组，每组9只。除正常对照组外，其余3组家兔右膝关节腔内注射木瓜蛋白酶制造膝骨性关节炎模型。造模成功后，苗药熏蒸组与苗药离子导入组家兔分别经苗药验方熏蒸治疗及苗药验方离子导入治疗20 d,取各组家兔软骨组织行苏木精-伊红染色，并取各组家兔血清
【基金项目】
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贵州省科技计划项目（No．黔科合基础[2017]1112）；
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目的 观察苗药验方对家兔骨关节炎模型软骨细胞的影响，并探讨其防治骨关节炎软骨退变的作用机制。方法 36只家兔随机分为正常对照组、模型组、苗药熏蒸组、苗药离子导入组，每组9只。除正常对照组外，其余3组家兔右膝关节腔内注射木瓜蛋白酶制造膝骨性关节炎模型。造模成功后，苗药熏蒸组与苗药离子导入组家兔分别经苗药验方熏蒸治疗及苗药验方离子导入治疗20 d,取各组家兔软骨组织行苏木精-伊红染色，并取各组家兔血清备用。取正常家兔软骨组织培养软骨细胞，将软骨细胞也分为4组：正常对照组、模型组、苗药薰蒸组、苗药离子导入组。除正常对照组外，其余3组软骨细胞用10μg/L白细胞介素-1β（IL-1β）处理24 h制备骨关节炎软骨细胞模型，造模期间分别用相应组家兔血清对软骨细胞进行体外干预，酶联免疫吸附法（ELISA）检测软骨细胞上清液中β-连环蛋白（β-catenin）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量，免疫印迹（Western blot）法检测软骨细胞中骨形态发生蛋白-2（BMP-2）、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、基质金属蛋白酶-13（MMP-13）、细胞外因子-16（Wnt-16）、β-catenin蛋白表达水平，实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测软骨细胞中BMP-2、MMP-3、MMP-13、Wnt-16、β-catenin mRNA表达水平。结果 与模型组比较，苗药熏蒸组、苗药离子导入组家兔关节软骨表面纤维化及其软骨细胞结构破坏均得到不同程度改善。与模型组比较，苗药薰蒸组软骨细胞上清液TNF-α、β-catenin的含量显著减少（均P＜0.05）,软骨细胞BMP-2、MMP-3、β-catenin蛋白表达以及BMP-2、Wnt-16 mRNA表达水平显著下调（均P＜0.05）;与模型组比较，苗药离子导入组软骨细胞上清液中TNF-α、β-catenin的含量显著减少（均P＜0.05）,软骨细胞BMP-2、MMP-3、MMP-13、β-catenin蛋白表达水平以及BMP-2、MMP-3、Wnt-16 mRNA表达水平显著下调（均P＜0.05）。结论 苗药验方薰蒸疗法及离子导入疗法，可能通过调节Wnt/β-catenin信号通路减轻骨性关节炎软骨细胞的损伤。
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