【摘 要】
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目的分析云南省恶性疟病例疟原虫虫株的富组氨酸蛋白Ⅱ(Histidine-rich protein-2,HRPⅡ)基因(Pfhrp2)序列的多态性,为研究疟原虫抗原基因缺失奠定基础。方法搜集2012年8月-2
【机 构】
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云南省寄生虫病防治所、云南省疟疾研究中心、云南省虫媒传染病防控研究重点实验室,大理大学基础医学院,
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目的分析云南省恶性疟病例疟原虫虫株的富组氨酸蛋白Ⅱ(Histidine-rich protein-2,HRPⅡ)基因(Pfhrp2)序列的多态性,为研究疟原虫抗原基因缺失奠定基础。方法搜集2012年8月-2015年9月云南省恶性疟现症病例的滤纸血样和相关信息,用PCR技术扩增血样中恶性疟原虫Pfhrp2基因exon2区并测序,测序成功序列与AY816237、AY816240、AY816301参比序列比对;用Mega 5.04分析Pfhrp2基因exon2区序列多态性,计算序列间保守位点、遗传距离等;根据氨基酸序列间遗传距离绘制聚类树状图。结果共收集云南省15个州(市)的恶性疟现症病例血样218份,病例感染来源地包括云南本地、非洲、缅甸等流行区。其中155份Pfhrp2基因exon2区扩增阳性和测序成功,编码氨基酸数在115~298之间,平均为239.7 aa,非洲(239.9 aa)、缅甸(239.5 aa)、云南(241.6 aa)感染虫株的氨基酸残基均数差异无统计学意义(F=0.025,P>0.05)。所有氨基酸残基序列均以12型重复作为结尾,以1型、2型重复为起始,比例各占98.1%(152/155)和1.9%(3/155),2型重复次数最多,为12.9次。155条Pfhrp2基因exon2区DNA序列的同源位点为894 bp,保守位点占20.8%(186/894),变异位点占78.2%(699/894),非洲虫株序列间遗传距离为0.000~0.741,缅甸为0.000~0.948,云南为0.000~0.750。所有155条序列按氨基酸序列大小聚类成3个大类,同一个层级的序列具有近似的序列长度和氨基酸重复类型。结论云南省恶性疟现症病例所感染疟原虫的Pfhrp2基因exon2区存在高度多态性,恶性疟原虫株主要按Pfhrp2基因exon2区的氨基酸序列长度进行聚类。
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