【摘 要】
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本研究预测naa cluster中的naaB基因负责催化烟酸到6-羟基烟酸的反应.通过对NaaB的蛋白序列进行分析,发现该酶含有三个亚基,分别由naaBL1、naaBS、naaBL2基因编码,其中naaBL1和naaBL2分别编码2个含有钼辅因子结合结构的大亚基,naaBS基因编码一个含有[2Fe-2S]簇的小亚基.本研究对naaB基因进行了克隆,将构建的重组质粒pME6032-naaBL1SL2分别转化到无色杆菌(Achromobacter sp.)和大肠杆菌(Escherichia coli)中,通过
【机 构】
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中国海洋大学环境科学与工程学院,海洋环境与生态教育部重点实验室,山东 青岛 266100;青岛农业大学生命科学学院,山东 青岛 266109;青岛农业大学生命科学学院,山东 青岛 266109;中国海
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本研究预测naa cluster中的naaB基因负责催化烟酸到6-羟基烟酸的反应.通过对NaaB的蛋白序列进行分析,发现该酶含有三个亚基,分别由naaBL1、naaBS、naaBL2基因编码,其中naaBL1和naaBL2分别编码2个含有钼辅因子结合结构的大亚基,naaBS基因编码一个含有[2Fe-2S]簇的小亚基.本研究对naaB基因进行了克隆,将构建的重组质粒pME6032-naaBL1SL2分别转化到无色杆菌(Achromobacter sp.)和大肠杆菌(Escherichia coli)中,通过HPLC和LC-MS检测验证了NaaB负责催化烟酸到6-羟基烟酸,并且在无色杆菌和大肠杆菌中NaaB均能够转化烟酸,这与之前报道烟酸羟化酶不能在大肠杆菌表达的结果不同,说明NaaB的基因编码和催化功能具有独特性.通过序列分析推测NaaB的这一特性可能跟该酶同时含有两个钼结合结构域的大亚基有关.
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