清热化湿方对MNU联合幽门螺杆菌感染小鼠胃组织中TNF-α、IL-8及TLR-4水平的影响

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目的 应用清热化湿方干预N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)联合幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染相关胃癌中TNF-α、IL-8、TLR-4蛋白及其m RNA表达变化,探讨清热化湿类方药防治胃癌的机制。方法 以BALB/c小鼠为研究对象,除正常组外,其余各组均采用MNU联合幽门螺杆菌灌胃法制备胃癌动物模型,分成模型组、阳性对照组(阿莫西林+克拉霉素+兰索拉唑肠溶片三联疗法)、治疗组(不同剂量清热化湿类中药)。应用光镜以及透射电镜观察胃癌小鼠胃组织形态学改变及超微结构变化;应用Real-time PCR技术、Western-blot技术检测MNU联合幽门螺杆菌感染相关胃癌中IL-8、TNF-α、TLR-4蛋白及其mRNA表达变化。结果 正常组无异常改变;模型组符合中分化腺癌改变;治疗组散在溃疡改变,未见异型细胞;阳性对照组炎性细胞浸润,符合溃疡改变,可见少许异型细胞。正常组无明显改变;模型组细胞间隙连接结构严重破坏,癌细胞散在于间质中;治疗组细胞间隙连接结构破坏,见少许凋亡小体。阳性对照组,细胞间隙连接结构破坏,分化较差,见少许凋亡小体。Western blot检测结果显示,从灰度值分析,与正常组比较,模型组IL-8、TLR-4、TNF-α表达上升,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组IL-8、TLR-4、TNF-α表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)。Real-time PCR检测结果提示,与正常组比较,模型组IL-8、TLR-4、TNF-α表达上升,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组IL-8、TLR-4、TNF-α表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 通过清热化湿类方药干预,可下调TLR4、IL-8、TNF-α的表达,从而抑制癌细胞增殖,发挥防治胃癌的效应。
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