小鼠骨形成蛋白BMP3的原核表达及多克隆抗体制备与鉴定

来源 :华北农学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yst598

【摘要】

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为构建小鼠BMP3蛋白原核表达载体,纯化BMP3蛋白,制备并鉴定BMP3蛋白小鼠多克隆抗体,以及对BMP3进行系统进化关系研究。采用RT-PCR方法从小鼠肝脏中克隆获得BMP3蛋白的表达菌

【作者】

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刘祥

【机构】

：

陕西理工学院生物科学与工程学院

【出处】

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华北农学报

【发表日期】

：

2015年3期

【关键词】

：

BMP3蛋白 RT-PCR 多克隆抗体 ELISA WESTERN BLOTTING BMP3 protein RT-PCR Polyclonal anti

【基金项目】

：

陕西省教育厅科学研究计划项目（2013JK0723）, 陕西理工学院人才启动项目（SLGQD13-15）

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为构建小鼠BMP3蛋白原核表达载体,纯化BMP3蛋白,制备并鉴定BMP3蛋白小鼠多克隆抗体,以及对BMP3进行系统进化关系研究。采用RT-PCR方法从小鼠肝脏中克隆获得BMP3蛋白的表达菌株;利用SDS-PAGE电泳切胶纯化、尿素梯度复性获得BMP3蛋白,免疫小鼠制备BMP3蛋白多克隆抗体;采用ELISA法检测抗体滴度达1∶3 200倍,Western Blotting证实抗血清具有很好的特异性。通过DNAMAN软件对BMP3序列同源性分析发现其C-端在不同动物间存在较高同源性;MEGA软件对BMP3序列

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