摘要：以江苏特色绵羊品种——湖羊为研究对象，克隆湖羊NR5A1基因全序列，分析其序列特征，并对湖羊组织和大、小卵泡中NRSAJ表达特征进行研究。结果表明，湖羊NRSAJ基因全长19 016 bp，含6个外显子和5个内含子;编码区全长1 386 bp，编码461个氨基酸残基，包含经典的DNA结合区（DBD）和配体结合区（IJBD）。RT-PcR结果显示NR5A1基因在湖羊组织中广泛表达，其中在卵巢中高表达，脾脏次之;qRT-PcR和westem b10t结果显示在湖羊大卵泡中NR5A1 mRNA和蛋白质水平均显著高于小卵泡，表明NRSA1基因参与调控湖羊卵泡发育，并与繁殖性能有关。
　　关键词：湖羊;NR5A1基因;序列特征;表达
　　中图分类号：s826.3 文献标识码：A 文章编号：1000-4440（2019）01-0114-08
　　羊NR5A1基因的研究较少，仅本实验室前期在湖羊上进行了NR5A1基因多态性的筛选和鉴定，结果表明NR5A1内含子区多态性可以作为分子标记筛选高繁殖力绵羊，但是对于湖羊NR5A1基因序列特征、组织表达模式及其在卵泡中表达的研究并未涉及。本研究以湖羊为研究对象，通过PCR扩增和克隆测序方法克隆湖羊NR5A1基因全序列，分析其序列特征，鉴别其组织表达模式及其在湖羊不同级别卵泡中表达差异，以期更全面了解NR5A1基因，为更详尽探索其参与调控湖羊繁殖性能的分子机制提供一定的理论参考。
　　1材料与方法
　　1.1试验材料
　　从江苏省苏州市东山湖羊资源保种区挑选纯种湖羊母羊，屠宰后取其心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大肠、小肠、卵巢、子宫和肌肉组织于液氮中保存带回实验室，于70℃冰箱保存，提取DNA、RNA和蛋白质用于后续试验。用手术剪分离卵巢中卵泡，得到大卵泡（直径