【摘 要】
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目的探索问号钩端螺旋体(简称钩体)对小鼠和人单核-巨噬细胞株NADPH氧化酶活性及活性氧簇(ROS)产生的影响，了解不同宿主巨噬细胞对问号钩体的杀菌机制。方法采用问号钩体56601株感染J774A.1和THP-1细胞建立钩体细胞感染模型，光度法测定细胞NADPH氧化酶活性和超氧离子O2－水平，免疫荧光法检测细胞ROS水平变化。结果光度法检测结果显示，问号钩体赖株感染2 h、4 h、12 h和24
【机 构】
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550004 贵阳，贵州省疾病预防控制中心,550025 贵阳，贵州大学动物科学学院,550025 贵阳，贵州大学动物科学学院,550025 贵阳，贵州大学动物科学学院,550004 贵阳，贵州省疾病
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目的探索问号钩端螺旋体(简称钩体)对小鼠和人单核-巨噬细胞株NADPH氧化酶活性及活性氧簇(ROS)产生的影响，了解不同宿主巨噬细胞对问号钩体的杀菌机制。
方法采用问号钩体56601株感染J774A.1和THP-1细胞建立钩体细胞感染模型，光度法测定细胞NADPH氧化酶活性和超氧离子O2－水平，免疫荧光法检测细胞ROS水平变化。
结果光度法检测结果显示，问号钩体赖株感染2 h、4 h、12 h和24 h后，J774A.1细胞NADPH氧化酶活性分别从感染前的0.619 0 μmol·min－1·mg－1上升至0.305 5 μmol·min－1·mg－1、6.141 5 μmol·min－1·mg－1、1.487 1 μmol·min－1·mg－1和0.964 6 μmol·min－1·mg－1；THP-1细胞NADPH氧化酶活性分别从感染前0.723 5 μmol·min－1·mg－1上升至0.884 2 μmol·min－1·mg－1、1.897 1 μmol·min－1·mg－1、1.125 4 μmol·min－1·mg－1和0.562 7 μmol·min－1·mg－1; 超氧离子结果显示，J774A.1细胞超氧离子水平由正常细胞的0.189 0 μmol/L分别上调至0.236 3 μmol/L、0.297 7 μmol/L、0.324 0 μmol/L和0.305 7 μmol/L；THP-1细胞由正常细胞的0.123 7 μmol/L分别上调至0.149 3 μmol/L、0.249 0 μmol/L、0.270 0 μmol/L和0.272 7 μmol/L；免疫荧光检测结果表示，钩体感染J774A.1和THP-1细胞2 h、4 h、12 h和24 h后，细胞ROS水平较正常细胞逐渐变强，24 h出现降低。
结论问号钩体感染J774A.1和THP-1细胞NADPH氧化酶活性和超氧离子O2－均显著上调，且J774A.1细胞上调更明显，结果有助于揭示巨噬细胞杀灭问号钩体的分子机制。
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