【摘 要】
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目的 构建针对人Cox-2基因的小干扰RNA（siRNA）表达载体,观察RNA干扰对肺癌细胞Cox-2基因表达的沉默作用。方法 设计Cox-2靶向的发夹状siRNA,依据设计合成两条互补的寡核苷酸链,
【机 构】
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河南省医学科学研究所免疫室,淮阳卫生学校,郑州市武警支队卫生队,郑州大学基础医学院
【基金项目】
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“十五”“211工程”重点学科建设项目（教重办2002第2号）
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目的 构建针对人Cox-2基因的小干扰RNA（siRNA）表达载体,观察RNA干扰对肺癌细胞Cox-2基因表达的沉默作用。方法 设计Cox-2靶向的发夹状siRNA,依据设计合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pSINsi-hU6载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体包裹转染人肺癌细胞NCI-H446,采用RT-PCR检测Cox-2基因mRNA表达的变化。结果 把针对Cox-2基因的siRNA的双链寡核苷酸片段克隆入pSINsi-hU6载体,经过酶切鉴定与测序,结果 正确;RT-PCR检测显示,Cox-
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