摘要：采用超声波协同提取法对荷叶总黄酮进行提取，通过单因素试验确定最佳的荷叶总黄酮提取工艺：提取时间20min，料液比1：30，乙醇浓度60%，温度50℃，验证试验证明实际提取率为4.85%。
　　关键词： 超声波法；荷叶总黄酮；协同提取
　　中图分类号：P631.5
　　荷叶为睡莲科莲属植物莲的叶。荷叶中的黄酮类化合物主要是荷叶苷，其次是槲皮素、异槲皮素等常见的黄酮类物质。本课题以荷叶为研究对象，利用超聲波协同法提取总黄酮，从而增加荷叶的附加值，将为荷叶在食品、药品中的应用提供科学依据。
　　1材料与方法
　　1.1试验材料
　　原料：荷叶（湖北武汉）：新鲜、无污染荷叶，采摘后洗净，用烘箱60℃烘干。主要试剂：芦丁（生化试剂，国药集团化学试剂有限公司）、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、盐酸、锌粉等均为分析纯。
　　1.2黄酮测定方法
　　用NaN02-Al（N03）3-NaOH体系络合化学吸光法测定黄酮。得到回归曲线方程：y=0.5095x+0.0019，R2=0.9997。式中：y，提取液吸光度；x，提取液黄酮类物质浓度，mg/ml。
　　1.3荷叶总黄酮单因素试验与分析
　　称取一定量的荷叶，在不同反应条件下，即处理时间、料液比、乙醇浓度、提取温度，测定总黄酮的提取率，从而比较选取最佳反应条件。
　　1.4荷叶总黄酮响应面分析
　　2结果与分析
　　2.1不同超声波处理时间对荷叶总黄酮提取率的影响
　　称取荷叶0.2g，在料液比为1：30、乙醇浓度为60%、温度为50℃的条件下，分别对不同超声波处理时间的荷叶测定总黄酮的提取率。从图1看出，在处理时间为20min条件下，荷叶总黄酮的提取率最高。
　　2.2不同料液比对荷叶总黄酮提取率的影响
　　称取荷叶0.2g，在乙醇浓度为60%、处理时间为20min、温度50℃的条件下，分别对不同料液比的荷叶测定总黄酮的提取率，比较选取最佳料液比。
　　由图2可知，料液比为1：30时，荷叶总黄酮提取率最高。
　　2.3不同乙醇浓度对荷叶总黄酮提取率的影响
　　称取荷叶0.2g，在超声波处理时间20min、提取温度50℃、料液比1：30的条件下，分别对不同乙醇浓度的荷叶测定总黄酮的提取率，比较选取最佳乙醇浓度。
　　由图3可知，在该条件下，当乙醇浓度为1：30时，荷叶总黄酮的提取率最高。
　　2.4不同提取温度对荷叶总黄酮提取率的影响
　　称取荷叶0.2g，在乙醇浓度为60%、超声波处理时间为20min、料液比1：30的条件下，分别对不同提取温度（30℃、40℃、50℃、60℃、70℃）的荷叶测定总黄酮的提取率，比较选取最佳反应温度。
　　由图4可知，在温度为50℃的条件下，荷叶总黄酮提取率最高。
　　3结论
　　荷叶总黄酮提取工艺：提取时间20min，料液比1：30，乙醇浓度60%，温度50℃，验证试验证明实际提取率为4.85%。