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目的研究祖师麻止痛喷雾剂的镇痛、抗炎、活血作用。方法采用小鼠热板法和甩尾法研究其镇痛作用;以二甲苯所致小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的炎症模型研究抗炎作用;以大鼠血瘀模型研究活血作用。结果祖师麻止痛喷雾剂能够延长小鼠的辐射热甩尾潜伏期,增加热板法所致疼痛的痛阈时间,降低二甲苯所致的小鼠耳壳肿胀度,降低角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀度,对大鼠血瘀模型有活血作用。结论祖师麻止痛喷雾剂具有明显的抗炎、镇痛、活血作用,可为临床应用提供实验依据。