猪日本脑炎病毒NS3基因实时RT—LAMP快速检测方法的建立

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【摘要】

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建立日本脑炎病毒一步法实时环介导逆转录等温快速扩增方法。根据日本脑炎病毒序列保守的非结构区基因NS3设计4条特异引物，用于扩增SAl4-14—2株、SAl03株和GD06株日本脑炎病

【作者】

：

田纯见林志雄罗长保罗琼鱼海琼陈茹曾碧健

【机构】

：

广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心

【出处】

：

动物医学进展

【发表日期】

：

2009年12期

【关键词】

：

日本脑炎病毒环介导逆转录等温扩增快速检测荧光定量 Japanese epidemic virus~ reverse transcription loop-

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建立日本脑炎病毒一步法实时环介导逆转录等温快速扩增方法。根据日本脑炎病毒序列保守的非结构区基因NS3设计4条特异引物，用于扩增SAl4-14—2株、SAl03株和GD06株日本脑炎病毒获得成功，在病毒感染的单层细胞和猪体内都可以检出病毒。与常规SYBRGreenl适时荧光RT—PCR方法比较和Ct值分析，用不同稀释度病毒RNA，两者敏感性相似，适时RT—PCR在模板浓度低时结果更稳定。FIP和BIP纯度会影响反应效果，反应时间和模板浓度会影响电泳条带。一般63℃～65℃30min可出现结果，模板浓度低时要

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